无需纯化的病毒表征系统! 全自动病毒荧光检测分析系统
在基因治疗领域,慢病毒载体(Lentivirus)是一种复制较慢的逆转录病毒,由HIV-1改造而来,常作为基因治疗的载体使用。
慢病毒载体的制备流程需要对病毒的物理滴度和感染滴度进行检测。
1. 现有的检测手段(如p24 ELISA)因病毒中p24蛋白的含量不同、含有p24蛋白的杂质(如外泌体)等因素的影响,无法精准地表征病毒的物理滴度,且此类方法均无法对空载病毒(无p24蛋白)进行表征,这就给感染滴度的检测带来了误差。
2. 在复杂的病毒工业化制备流程中,只测量末端纯化产品的滴度,无法真实反映各个生产环节的生产效率,而对各个生产环节的样品都进行纯化表征会浪费大量人力物力。目前研究者亟需一种无纯化、快速、检测下限低的病毒表征手段。
3. 目前的病毒表征手段,均无法将病毒的物理参数如粒径(与载体聚合相关)与蛋白质组分析联系起来。因此,这些技术无法分析病毒滴度受样品聚集或病毒破裂与分解影响的情况,因此无法区分单分散制剂与聚集样品。
对于上述问题,美国NanoView公司所开发的全自动病毒荧光检测分析系统是一款无需纯化的、全自动的可对病毒进行表征分析的全新设备。该设备能够提供全方位的病毒表征信息,包括病毒粒径、病毒表面和内部病毒蛋白、病毒物理滴度、空载比检测、病毒转导效率及假型定量表征等。操作简单,结果可靠。
全自动病毒荧光检测分析系统的基本原理是一种基于特异性免疫捕获技术,允许研究者直接分析特定群体的病毒。通过配套的试剂盒,客户一次性能够分析多达16个不同的样本,大大节省了时间和经济成本。
和传统的病毒表征手段相比,全自动病毒荧光检测分析系统有如下优势:
ViroFlex定制化检测原理:
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先将连接蛋白与所需的定制抗体连接
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再将连接抗体的连接蛋白与ViroFlex芯片表面的连接蛋白抗体连接
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所需的定制抗体从而结合到了芯片上
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将样品在芯片上孵育,定制抗体即可特异性捕获病毒
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每个芯片最多可结合两种定制化捕获抗体
ExoViewTM参数信息:
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颗粒大小分辨范围:20nm
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最低检测浓度为106 VP/mL
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所需样本体积:35 μL
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激发波长:410 nm,488 nm,555 nm,640 nm,750nm
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可一次检测16个样本,每个样本可同时检测6个不同亚型及4种生物标记的荧光定位
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捕获抗体:一个芯片最多允许6种捕获抗体(+阴性对照)
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荧光通道:4个荧光通道